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        首页 > 产品中心 > qRT-PCR专用逆转录预混液

        Prescript Ⅱ RT ProMix For qPCR (+gDNA clearer)

        货  号:
        R418AR418B
        规  格:
        50rxn100rxn
        价  格:
        ¥780¥1295
        数  量:
        -1+
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        预混液形式的qRT-PCR首选试剂(去基因组)
        产品概述

              本产品所使用的PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白结构, 具有与野生型相同的聚合酶活性, 可用于较长的cDNA合成以及全长cDNA文库的构建等。产品包含合成高质量cDNA所需的所有成分,适合于两步法RT-qPCR检测。4× gDNA clearer可彻底去除残留的基因组DNA污染,保证后续定量结果更加可靠。10× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、Oligo (dT)23VN、Random hexamers、dNTPs和gDNA clearer终止成分,保证cDNA的完整性。此外,产品针对qPCR进行特别优化,比例优化的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix,可以在45 min内高效合成qPCR所用的模板cDNA。

        产品内容
         
        组分 R418A R418B
        4× gDNA clearer 200 μL 400 μL
        10× RT Reaction Mix 100 μL 200 μL
        Prescript Ⅱ Enzyme Mix 100 μL 200 μL
        RNase-free ddH2O 1 mL 1 mL

         

        产品优势

        更高效的逆转录效率:PreScript II Reverse Transcriptase保留了完整的蛋白结构, 具有与野生型相同的聚合酶活性,提高了逆转录效率
        完全预混型试剂:只要添加模板RNA和水,就可以简便高效率地合成cDNA,且重复性良好
        宽广的模板使用范围:反应体系中Total RNA的使用范围宽广,便于使用
        强劲的基因组DNA清除能力:4× gDNA clearer可彻底去除残留的基因组DNA污染,保证后续定量结果更加可靠

        实验案例

        1.  gDNA Remover对基因组DNA去除效果的确认
         
         
              为了确认gDNA Remover对基因组DNA的去除效果,按以上表格条件进行了逆转录反应,接着用同一基因进行Realtime PCR检测。结果显示,用gDNA Remover处理后,即在③的条件时,没有扩增出现,可以确认基因组DNA已被去除掉。

        2.  与其他公司同类型产品基因组DNA去除能力的比较

         
         
              在HeLa total RNA中添加过量的人基因组DNA,与其他公司同类型试剂盒进行基因组DNA去除能力的比较模拟实验。结果显示,本产品去除基因组DNA效果更加明显。

        3.  优异的cDNA合成效率

         
         
              在10 μL反应体系中分别添加HeLa细胞来源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg,分别进行逆转录反应。然后,在Realtime PCR反应液(使用本公司S018产品)中分别添加上述的逆转录反应液各1% (V/V),用Realtime PCR对ACTB和B2M的cDNA量进行定量,然后进行cDNA合成量的比较。结果可见,在探讨的范围内,模板RNA的量和cDNA的得率密切相关,但无论模板RNA量的多寡,仍可维持很高的cDNA合成效率。可见在目的片段浓度有差异的样品之间,逆转录反应效率的变化并不大,因此可将定量结果的误差控制在最小范围内。

        4.  强大的逆转录能力

         
         
              以HeLa细胞Total RNA为模板,选择高、中、低三种表达量的基因,在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录,然后用Realtime PCR检测多对基因,结果表明,对不同表达量的基因,本产品都具有优异的逆转录能力。

        应用范围

        合成用于qPCR的cDNA模板,特别是较长的cDNA合成;全长cDNA文库的构建。

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