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        首页 > 产品中心 > qRT-PCR专用逆转录预混液

        Prescript Ⅲ RT ProMix For qPCR

        货  号:
        R420AR420B
        规  格:
        50rxn100rxn
        价  格:
        ¥750¥1350
        数  量:
        -1+
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        更高效的qRT-PCR专用预混液
        产品概述

              本产品基于PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase,包含合成高质量cDNA所需的所有成分,适合于两步法RT-qPCR检测。通过定点突变得到的PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase是RNase H活性缺失的全新逆转录酶,酶的热稳定性和cDNA合成效率得到大幅提升。2× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、Oligo (dT)23VN、Random hexamers和dNTPs,PreScript Ⅲ Enzyme Mix包含PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase和RNase Inhibitor。此外,产品针对qPCR进行特别优化,可以在15 min内短时高效地合成qPCR所用的模板cDNA。
         
        产品内容
         
        组分 R420A R420B
        2× RT Reaction Mix 500 μL 1 mL
        PreScript Ⅲ Enzyme Mix 100 μL 200 μL
        RNase-free ddH2O 1 mL 1 mL

         

        产品优势

        高度的热稳定性:全新的逆转录酶PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase具有更好的热稳定性
        对复杂模板具有良好的延伸性能:在50℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸
        模板兼容性高:兼容不同物种及完整度较差的Total RNA
        短时高效的进行逆转录:优化比例的Random primers/Oligo (dT)23VN primer mix,可以在15 min内短时高效地合成qPCR所用的模板cDNA

        实验案例

        1.  优异的cDNA合成效率
         
         
         
              在10 μL反应体系中分别添加HeLa细胞来源的Total RNA 0.5 μg~0.5 pg,分别进行逆转录反应。然后,在Realtime PCR反应液(使用本公司S018产品)中分别添加上述的逆转录反应液各1% (V/V),用Realtime PCR对ACTB和B2M的cDNA量进行定量,然后进行cDNA合成量的比较。结果可见,在探讨的范围内,模板RNA的量和cDNA的得率密切相关,但无论模板RNA量的多寡,仍可维持很高的cDNA合成效率。可见在目的片段浓度有差异的样品之间,逆转录反应效率的变化并不大,因此可将定量结果的误差控制在最小范围内。

        2.  与其他公司逆转录性能的比较

         
         
              以梯度稀释的HeLa细胞Total RNA为模板,在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录,然后用Realtime PCR 进行检测。结果表明,与A公司同类产品相比,PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase产品具有更高的逆转录性能。

        3.  对不同模板的逆转录能力

         
         
              以HeLa细胞Total RNA为模板,挑选高、中、低三种表达量的基因,在说明书提供的反应体系及反应条件下进行逆转录,然后用Realtime PCR检测多对基因,结果表明,对不同表达量的基因,本产品都具有优异的逆转录能力。
         
        应用范围

        合成用于qPCR的cDNA模板,高质量 cDNA合成;全长cDNA文库的构建等。

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